技術(shù)文章
Technical articles（一）原理DEAE-SephadexA-50（二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50）為弱堿性陰離子交換劑。用NaOH將CL-型轉(zhuǎn)變?yōu)镺H-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白（等電點為PH6.85～7.5），其余均屬酸性蛋白。在PH7.2～7.4的環(huán)境中，酸性蛋白均被DEAE-SephadexA-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。因此，通過柱層析γ球蛋白便可在洗脫中先流出,而其他蛋白則被吸附在柱上,從而便可分離獲得純化的IgG。DEAE-sephadexA-50柱層析是...
1975年，Kohler和Milstein發(fā)現(xiàn)將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合，形成的雜交細胞既可產(chǎn)生抗體，又可無限增殖，從而創(chuàng)立了單克隆抗體雜交瘤技術(shù)。這一技術(shù)上的突破不僅為醫(yī)學與生物學基礎研究開創(chuàng)了新紀元，也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。制備單克隆抗體包括動物免疫、細胞融合、選擇雜交瘤、檢測抗體、雜交瘤細胞的克隆化、凍存以及單克隆抗體的大量生產(chǎn)，要經(jīng)過幾個月的一系列實驗步驟，下面按照制備單克隆抗體的流程順序，逐一介紹其實驗方法。細胞融合前準備細...
撰稿李恩善免疫血清的制備是一項常用的免疫學實驗技術(shù)。價、高特異性的免疫血清可作為免疫學診斷的試劑（如用于制備免疫標記抗體等），也可供特異性免疫治療用。免疫血清的效價高低取決于實驗動物的免疫反應性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強的抗原刺激高應答性的機體，?？色@得價的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫時，則需同時加用佐劑以增強抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。因此，如欲獲得高特異性的免疫血清，必須予先純化抗原。此外，抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時間...
薄基底膜腎病Ⅳ型膠原α鏈分布的免疫組化研究張承英朱世樂章友康鄭欣鄂潔侯平薄基底膜腎?。═BMN）是以持續(xù)性鏡下血尿為主要表現(xiàn)的一種遺傳性腎病，腎小球基底膜（GBM）彌漫性變薄為該病惟一重要的病理學特征。既往關(guān)于Alport綜合征（Alportsyndrome,AS），另外一種以持續(xù)性鏡下血尿,GBM變薄增厚、撕裂、分層為特征的遺傳性腎病，Ⅳ型膠原α鏈分布的免疫組化研究較多，眾多研究表明,AS患者腎小球基底膜Ⅳ型膠原α3、α4、α5鏈表達缺陷［1］,而關(guān)于薄基底膜腎病Ⅳ型膠原α...
趙彩彥劉金星王淑琴甄真周俊英采用ABS-ELISA法（藥盒由比利時Innogentics公司提供）和雙抗體夾心ELISA法（藥盒由法國Immunotech公司或軍事醫(yī)學科學院提供）對46例肝炎肝硬化進行了血清和腹水中IL-6、IL-2、TNF-α的測定。與正常對照組比較，肝炎肝硬化患者血清和腹水IL-6、TNF-α水平明顯升高，IL-2水平明顯降低。合并自發(fā)性腹膜炎（SBP）患者血清IL-6、TNF-α水平為（33.19±12.31）ng/L,（11.73&pl...
隨著分子生物學、免疫學理論和技術(shù)的發(fā)展，運用重組表達技術(shù)來生產(chǎn)預防和治療疾病的制品已成為近幾年研究的熱點。白細胞介素-2是一種具有廣泛生物學活性的細胞因子，它能夠有效地提高免疫功能，醫(yī)學上已用于預防和治療一些常規(guī)方法難以治療的疾病，如腫瘤等；在獸醫(yī)方面因其能提高疫苗的免疫效果，尤其是在基因工程亞單位苗的免疫效果而倍受重視，展現(xiàn)出廣闊的應用前景。一、白細胞介素-2的受體及其生物學功能：白細胞介素-2（IL-2）是一種zui早發(fā)現(xiàn)的具有廣泛生物活性的細胞因子，在1979年第二屆淋...
經(jīng)過近20年的產(chǎn)前診斷經(jīng)驗，發(fā)現(xiàn)染色體異常的胎兒檢出率并不理想，如羊水細胞培養(yǎng)結(jié)果只有2-3%，孕早期的絨毛細胞檢查發(fā)現(xiàn)異常率為7.5-10%左右。這說明原有高危人群的定義范圍還有待改進。例如目前產(chǎn)前診斷適應仍以高齡孕婦占絕大多數(shù)，國外為80-90%，國內(nèi)高齡者較少，但在產(chǎn)前診斷中也占1/3左右。而先天愚型兒中只有20%是由高齡孕婦所生。因此如何從普通人群中，特別是年紀小于35歲的人群中篩選出高危者的問題已經(jīng)引起許多學者的關(guān)注，并進行了有關(guān)研究。近年來已有不少國家采用在孕中期...
ELISPOT斑點酶聯(lián)免疫分析使細胞因子分泌過程更加形象。因為細胞因子圍繞在細胞周圍，在被上清液稀釋之前，會和鄰近細胞表面的受體結(jié)合，或者降解。細胞因子和GranzemyBELISPOT實驗是zui有效的體外監(jiān)控CD4或CD8T細胞抗原的方法。通過測定單個細胞因子信號及其頻率，可以建立具有不同集落大小的特殊T細胞庫。ELISPOT實驗檢測細胞因子的*優(yōu)勢☆從1到10，000，000，可以測量體外細胞因子的分泌頻率，和ELISA以及四聚體染色、細胞內(nèi)細胞因子染色相比，具有靈敏度...
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